Practica 3 Siembras en medio de cultivo

CBTIS NO. 155

OPERAR EQUIPO Y MATERIALES DE LABORATORIO

DR. VICTOR MANUEL ALFARO LOPEZ

2LV(M)

PRACTICA 3, 3 PARCIAL, SIEMBRA EN MEDIO DE CULTIVO

GRANADOS JAIME LUZ MARIA

Indicaciones

El alumno debe realizar una siembra de medio de cultivo de forma estriada, variada y aplicar el nombre de cada una de ellas de las que anteriormente se dieron en el salón de clases.

Materiales:

6-7 cajas petri de medios de cultivo anteriormente habilitadas o elaboradas.

Asa bacteriológica

Vasos de precipitados con 25 ml de agua destilada

2 mecheros de bunsen

Papel blanco para la meza

Masking tape color café

3-4 Torundas de algodón

2 torundas de algodón con alcohol

Muestras para siembra

• Saliva
• Muestra interdental
• Orina
• Agua preparada de la calle
• Verdura de las que utilizan para preparar tortas
• Muestra de sangre

Tubo cónico de plástico

Técnica de extracción sanguínea

Para esta técnica se utilizan los siguientes materiales:

• Jeringa de 5 ml para extraer 2.5ml
• Torundas de algodón con alcohol
• Torniquete

Se realiza asepsia y antisepsia del piegle del brazo utilizando una torunda de algodón con alcohol

Los movimientos de limpieza son de arriba hacia abajo del brazo al antebrazo nunca regresarlo por que contaminamos el área.

Una vez echa la asepsia y antisepsia iniciamos la técnica de venopunción y para ello debemos manejar nuestra jeringa poder usar desechable.

Se verifica el aseguramiento de la aguja de la jeringa dándole un pequeño giro y nuevamente apretando y posteriormente jalando el embolo hacia atrás de la misma y que a su ves lo regresamos al fondo de la jeringa quedando esta lista para su uso.

Una ves lista nuestra jeringa y ya limpia la zona de pliegue se aplica el torniquete en parte media del brazo para hacer presión y obtener una vaso dilatación del conducto sanguíneo, en el cual se introducirá la aguja de la jeringa que es punzo cortante y ya estando dentro del vaso sanguíneo extraemos la sangre en cantidad de un volumen de 2.5 ml la que depositaremos en el tubo con tapón rojo sin anticoagulante.

No se retira el tapón de el tubo y una vez tomado el tiempo desde su extracción hasta el llenado del tubo registraremos el tiempo de coagulación que es de 1-5minutos hasta 8 minutos el tiempo real esta entre 1-2minutos.

Una vez coagulada la sangre en el tubo de ensaye, retiraremos el tapón y centrifugamos a 1500 revoluciones por minutos durante 5 minutos teniendo como resultado la precipitación del paquete sanguíneo por centrifugación al que le daremos el nombre de separación de paquete y plasma.

Una ves separado el paquete en el tubo de ensaye vacío trasvasamos el plasma sanguíneo el cual es de color amarillo pálido o amarillo paja y se utilizara para realizar la siembra.

Nota: esta técnica se utilizara nuevamente en la practica numero 8 que seria aglutinación

Se sembrara el liquido plasmatico en medio de cultivo utilizando la tecnica con barita de cristal denominada siembra por dispersión.

Desarrollo

Fase pre analítica

Entramos al laboratorio nos colocamos el equipo de bioseguridad completo

El profesor entrego a cada meza distintas cajas de medio de cultivo las cuales eran distintas

Nos dio el profesor una caja de agar de hierro de Kligler, una caja de agar destrosa saubouraud, 2 cajas agar salmonela y síguela y 2 cajas de agar Mac Conkey.

En cada una de las diferentes cajas se iba sembrar cosas diferentes

Primero se hizo la extracción de sangre a navarro Llanes Javier y se deposito la sangre en el tubo de tapón rojo.

Se hizo un raspado de pie a gracia luna Viridiana después se tomo una muestra interdental de la misma persona.

Luego se tomo una muestra interdental a Edgar Eduardo Vásquez

Y también se tomo una muestra de lechuga de una torta de la cafetería.

Fase analítica

La muestra de raspado de pie se sembró en el agar dextrosa sabouraud con el método tradicional de las cuatro estrías. Que es tomando una muestra pequeña con el asa bacteriológica ya esterilizada de el portaobjetos con el cual se realizo el raspado y se hacen cuatro zig-zags.

Con el isótopo con el que se tomo la muestra interdental de Viridiana gracia luna se realizo la siembra en el agar de Mac Conkey con el método de aislamiento por estrías.

Con la muestra interdental de Edgar Eduardo Vázquez se realizo el mismo procedimiento en el mismo agar.

La sangre de Javier Navarro Llanes se dejo coagular y después se centrífugo a 1500 revoluciones por minuto durante 5 minutos.

Después el plasma sanguíneo se vacío a un tubo vacío y de ahí se tomo una muestra con el asa y se sembró en 2 medios de cultivo de agar salmonela y síguela utilizando el método de Kass en el cual se pasa el asa por en medio de la caja de extremo a extremo y se forma una especie de M en zig-zag.

Con la muestra de lechuga se realizo el método de tapete o cuadriculado en el agar de Hierro de Mac Conkey.

Al finalizar todas las siembras se taparon y se entregaron al profesor.